等電聚焦電泳

等電聚焦電泳是一種生物化學分離技術，主要用于分離和純化帶電的生物大分子如蛋白質、核酸等。相比于其他方法，等電聚焦電泳具有高分辨率、高重復性和高通量等優(yōu)勢。

1. 等電聚焦電泳名詞解釋

   等電聚焦電泳是指將待分離的大分子（如蛋白質）在電極場的作用下，聚焦到等電點位置進行分離的一種技術。在等電點位置，分子的凈電荷為零，會發(fā)生停滯或懸停現(xiàn)象，進而實現(xiàn)分離。該技術需要借助等電聚焦板進行實現(xiàn)，利用板中由多種緩沖液形成的 pH 梯度，在電極作用下使大分子濃度高的樣品在 pH 值逐漸增大的梯度中向更高 pH 值處遷移，直至達到等電點被分離出來。

2. 等電聚焦電泳的原理

   等電聚焦電泳利用 pH 值梯度和電場的作用，將帶電生物大分子沿著 pH 梯度移動到等電點上進行聚焦分離。通常使用的實驗裝置是一個等電聚焦板，其內部設有緩沖液隨 pH 值逐漸變化的 pH 梯度，并有正負兩個電極使緩沖液呈現(xiàn)水平方向的電場。將待檢測樣品施加于模板一端，通過順序施加電壓，首先對樣品中存在的離子進行IEF（等電聚焦）的初步分離，之后可以對ISF（溶膠聚集）初始分離的多肽或者核酸片段進一步的分離。

3. 等電聚焦電泳的特點

   等電聚焦電泳具有高靈敏度、高分辨率和高效率的特點。在 IEF 過程中通過 pH 值梯度的形成，能夠有效地將帶電小分子、蛋白質等分離開來，在樣品量少的時候也可以準確檢測。此外，等電聚焦電泳還有一個重要應用是對已知電荷狀態(tài)的蛋白質進行定量分析，如凝膠條滴液分析的方法。